โครมาโตกราฟีของเม็ดสีพืช

การแยกคลอโรฟิลล์และแคโรทีนอยด์โดยใช้โครมาโตกราฟีกระดาษ

Qualitative Analysis Intermediate (High School) 60 นาที ~$8.00

วัตถุประสงค์

แยกและระบุเม็ดสีพืชโดยใช้โครมาโตกราฟีกระดาษ และคำนวณค่า Rf สำหรับแต่ละเม็ดสี

ความเป็นมา

Paper chromatography separates mixtures based on differential affinity for the stationary phase (paper) and mobile phase (solvent). Plant leaves contain multiple pigments: chlorophyll a (blue-green), chlorophyll b (yellow-green), xanthophylls (yellow), and carotenoids (orange). These pigments have different polarities, causing them to travel different distances up the paper as the solvent front advances.

คำเตือนด้านความปลอดภัย

  • Acetone and petroleum ether are highly flammable — no open flames
  • Work in a well-ventilated area or fume hood
  • Avoid inhaling solvent vapors
  • Petroleum ether is a skin irritant

อุปกรณ์ป้องกันส่วนบุคคลที่จำเป็น

goggles gloves lab_coat

วัสดุ

  • Fresh spinach leaves (5–10 leaves)
    Or other dark green leaves
  • Acetone or isopropanol (50 mL)
    Extraction solvent
  • Petroleum ether (30 mL)
    Chromatography solvent
  • Chromatography paper (2 strips)
    Whatman No. 1 or equivalent
  • Sand (1 teaspoon)
    For grinding

อุปกรณ์

Mortar and pestle Beaker (250 mL) with watch glass cover Pencil (not pen) Ruler Capillary tube Scissors

ขั้นตอนปฏิบัติ

1

Grind spinach leaves with a pinch of sand and 5 mL acetone in a mortar until a deep green extract forms.

5 นาที Acetone is flammable
2

Draw a pencil line 2 cm from the bottom of the chromatography paper. Apply the extract using a capillary tube in a small spot. Let dry and reapply 3–4 times to concentrate.

10 นาที
3

Pour petroleum ether into the beaker to a depth of about 1 cm. Suspend the paper strip so the origin line is just above the solvent level.

5 นาที Work in fume hood
4

Cover the beaker with a watch glass and let the solvent rise by capillary action. Do not disturb until the solvent front is 1–2 cm from the top.

25 นาที
5

Remove the paper, immediately mark the solvent front with pencil. Let dry completely.

5 นาที
6

Identify the colored bands: carotenoids (orange, highest Rf), xanthophylls (yellow), chlorophyll a (blue-green), chlorophyll b (yellow-green, lowest Rf). Calculate Rf values for each band.

10 นาที

ผลลัพธ์ที่คาดหวัง

Four or more colored bands should be visible. Carotenoids (orange) travel farthest (Rf ≈ 0.9–0.95). Xanthophylls (yellow) at Rf ≈ 0.7. Chlorophyll a (blue-green) at Rf ≈ 0.5. Chlorophyll b (yellow-green) at Rf ≈ 0.4.

การทำความสะอาด

Allow all solvents to evaporate in the fume hood. Dispose of paper in general waste. Clean mortar and pestle thoroughly.

รายละเอียด

หมวดหมู่
Qualitative Analysis
ระดับความยาก
Intermediate (High School)
ระยะเวลา
60 นาที
ค่าใช้จ่ายโดยประมาณ
$8.00
ขั้นตอน
6
วัสดุ
5

การทดลองเพิ่มเติม

การทดสอบน้ำกระด้างด้วยสารละลายสบู่ 40 min การทดสอบไบลสไตน์สำหรับฮาโลเจน 25 min การทดสอบแป้ง-ไอโอดีนสำหรับคาร์โบไฮเดรต 30 min การทดสอบระบุไอออนลบ 60 min การทดสอบลูกปัดบอแรกซ์สำหรับไอออนโลหะ 45 min การระบุไอออนบวกโดยการตกตะกอน 90 min ความท้าทายในการระบุสารที่ไม่รู้จัก 75 min รุ้งสีอินดิเคเตอร์ pH 45 min สเปกโตรสโคปีการแผ่แสงจากเปลวไฟ 60 min

Frequently Asked Questions

What is the objective of โครมาโตกราฟีของเม็ดสีพืช?
แยกและระบุเม็ดสีพืชโดยใช้โครมาโตกราฟีกระดาษ และคำนวณค่า Rf สำหรับแต่ละเม็ดสี
How difficult is โครมาโตกราฟีของเม็ดสีพืช?
This experiment is rated as Intermediate (High School). It takes approximately 60 minutes to complete.
What safety precautions are needed for โครมาโตกราฟีของเม็ดสีพืช?
Key safety precautions include: Acetone and petroleum ether are highly flammable — no open flames; Work in a well-ventilated area or fume hood; Avoid inhaling solvent vapors.
What materials are needed for โครมาโตกราฟีของเม็ดสีพืช?
The main materials required are: Fresh spinach leaves, Acetone or isopropanol, Petroleum ether, Chromatography paper, Sand.
What results should I expect from โครมาโตกราฟีของเม็ดสีพืช?
Four or more colored bands should be visible. Carotenoids (orange) travel farthest (Rf ≈ 0.9–0.95). Xanthophylls (yellow) at Rf ≈ 0.7. Chlorophyll a (blue-green) at Rf ≈ 0.5. Chlorophyll b (yellow-green) at Rf ≈ 0.4.