การหาปริมาณกลูโคสแบบโคโลริเมทรี

การวัดกลูโคสในเลือดแบบเปรียบเทียบโดยใช้วิธี DNS

Colorimetry Intermediate (High School) 60 นาที ~$10.00

วัตถุประสงค์

หาความเข้มข้นกลูโคสโดยใช้วิธีโคโลริเมทรีของกรดไดไนโตรซาลิไซลิก (DNS) และทำความเข้าใจเคมีของน้ำตาลรีดักชัน

ความเป็นมา

The DNS method is a classic colorimetric assay for reducing sugars. 3,5-dinitrosalicylic acid (yellow) is reduced by the free aldehyde group of glucose to 3-amino-5-nitrosalicylic acid (orange-red). The color change occurs upon heating, and the intensity at 540 nm is proportional to the reducing sugar concentration. This method is widely used in food science and fermentation monitoring.

คำเตือนด้านความปลอดภัย

  • DNS reagent contains NaOH — corrosive to skin
  • Boiling water bath — handle tubes with tongs
  • Cool tubes before opening to prevent splattering
  • DNS reagent stains skin yellow

อุปกรณ์ป้องกันส่วนบุคคลที่จำเป็น

goggles gloves lab_coat

วัสดุ

  • DNS reagent (100 mL)
    1% DNS in NaOH with sodium potassium tartrate
  • Glucose stock solution (100 mL)
    10 mg/mL in water
  • Unknown sugar solution (20 mL)
  • Distilled water (200 mL)

อุปกรณ์

Spectrophotometer or colorimeter Cuvettes Boiling water bath Test tubes (10) with caps Pipettes (1 mL, 5 mL) Ice bath Timer

ขั้นตอนปฏิบัติ

1

Prepare glucose standards: 0, 1, 2, 4, 6, 8, 10 mg/mL by diluting the stock solution.

10 นาที
2

Add 1 mL of each standard and the unknown to labeled test tubes. Add 1 mL of DNS reagent to each tube.

5 นาที DNS contains NaOH
3

Place all tubes in a boiling water bath for exactly 5 minutes. The color changes from yellow to orange-red.

5 นาที Use tongs for hot tubes
4

Transfer tubes immediately to an ice bath to stop the reaction. Cool for 2 minutes.

2 นาที
5

Add 8 mL of distilled water to each tube and mix well.

5 นาที
6

Measure absorbance at 540 nm. Zero with the blank (0 mg/mL glucose).

15 นาที
7

Plot the calibration curve and determine the glucose concentration of the unknown.

18 นาที

ผลลัพธ์ที่คาดหวัง

A linear calibration curve from 1–10 mg/mL glucose. The color intensifies from pale yellow (blank) to deep orange-red (10 mg/mL). Non-reducing sugars like sucrose give no color change.

การทำความสะอาด

Neutralize DNS waste with dilute HCl before disposal. Clean test tubes immediately as dried DNS residue is difficult to remove.

รายละเอียด

หมวดหมู่
Colorimetry
ระดับความยาก
Intermediate (High School)
ระยะเวลา
60 นาที
ค่าใช้จ่ายโดยประมาณ
$10.00
ขั้นตอน
7
วัสดุ
4

การทดลองเพิ่มเติม

การตรวจสอบกฎของเบียร์-แลมเบิร์ต 60 min การทดสอบโปรตีนแบบโคโลริเมทรี (วิธีแบรดฟอร์ด) 60 min การวิเคราะห์ส่วนผสมโดยสเปกโตรโฟโตเมทรี 75 min การวิเคราะห์สีผสมอาหารโดยสเปกโตรโฟโตเมทรี 60 min การหาปริมาณฟอสเฟตแบบโคโลริเมทรี 90 min การหาปริมาณเหล็กในน้ำ 75 min การหาปริมาณแอสไพรินโดยสเปกโตรโฟโตเมทรี 75 min

Frequently Asked Questions

What is the objective of การหาปริมาณกลูโคสแบบโคโลริเมทรี?
หาความเข้มข้นกลูโคสโดยใช้วิธีโคโลริเมทรีของกรดไดไนโตรซาลิไซลิก (DNS) และทำความเข้าใจเคมีของน้ำตาลรีดักชัน
How difficult is การหาปริมาณกลูโคสแบบโคโลริเมทรี?
This experiment is rated as Intermediate (High School). It takes approximately 60 minutes to complete.
What safety precautions are needed for การหาปริมาณกลูโคสแบบโคโลริเมทรี?
Key safety precautions include: DNS reagent contains NaOH — corrosive to skin; Boiling water bath — handle tubes with tongs; Cool tubes before opening to prevent splattering.
What materials are needed for การหาปริมาณกลูโคสแบบโคโลริเมทรี?
The main materials required are: DNS reagent, Glucose stock solution, Unknown sugar solution, Distilled water.
What results should I expect from การหาปริมาณกลูโคสแบบโคโลริเมทรี?
A linear calibration curve from 1–10 mg/mL glucose. The color intensifies from pale yellow (blank) to deep orange-red (10 mg/mL). Non-reducing sugars like sucrose give no color change.